Para este estudo foram recrutados homens e mulheres saudáveis que trabalham em escritórios, com idades entre 20 e 60 anos, residentes em Tóquio e arredores. Os participantes receberam explicações detalhadas sobre o objetivo e os riscos potenciais do estudo e 251 profissionais forneceram consentimento por escrito e participaram de uma triagem que incluiu exames de sangue e de urina, exames físicos, aferição da pressão arterial e o preenchimento de um questionário sobre estilo de vida e perfil profissional. No total, 200 profissionais saudáveis, de ambos os sexos e com idades entre 23 e 59 anos, atenderam aos critérios de inclusão e não apresentaram nenhum dos critérios de exclusão. Os participantes foram distribuídos igualmente em dois grupos, com base na idade, no sexo e no índice de massa corporal (IMC): um grupo consumiu LcS-FM e o outro consumiu um leite não fermentado como controle (CM). O delineamento do estudo baseou-se no artigo de Vaisberg et al. Os participantes consumiram um frasco (80mL) de LcS-FM ou CM diariamente durante 28 dias, entre janeiro e fevereiro de 2024.
Após uma avaliação médica para confirmar o estado de saúde dos participantes foram coletadas amostras de sangue (15mL) na clínica Chiyoda Para Medical Care Clinic (Chiyoda, Tóquio, Japão) no dia 0 e nos dias 14 e 28 após o início do consumo. As amostras de sangue foram imediatamente transferidas para a CPCC Co., Ltd. (Chiyoda, Tóquio, Japão) e foram obtidos células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) e soro. As PBMCs foram marcadas com um anticorpo marcado com metal para análise por citometria de massa (CyTOF) pela equipe da CPCC, e as amostras foram transferidas para o St. Luke’s SRL Advanced Clinical Research Center, Inc. (Chuo, Tóquio, Japão) para a realização da análise por CyTOF. Os dados de CyTOF e as amostras de soro obtidos foram encaminhados ao Yakult Central Institute (Kunitachi, Tóquio, Japão) para análise por CyTOF e quantificação de citocinas.
Durante o período de pré-observação de 14 dias e os 28 dias do estudo principal, os registros em diários de vida cotidiana e as respostas a questionários foram coletados on-line e gerenciados pela CPCC Co., Ltd. Foi realizada uma avaliação utilizando a escala visual analógica (EVA) para monitorar as condições de saúde dos participantes no momento basal (dia 0) e nos dias 7, 14, 21 e 28. A empresa CPCC Co., Ltd. foi contratada para o estudo a fim de garantir o cegamento. O estudo foi analisado pelo comitê de ética da Chiyoda Para Medical Care Clinic (IRB nº 15000088). O protocolo do estudo foi registrado na University Hospital Medical Information Network (000052964). As amostras de soro foram manuseadas em conformidade com as diretrizes do Comitê de Biossegurança do Yakult Central Institute (Aprovação nº 1282).
Composição das bebidas teste e controle
CM refere-se a um leite não fermentado. O LcS-FM foi produzido na Aichi Yakult Plant Co., Ltd. (Nisshin, Aichi, Japão), e o CM foi produzido na Seção de Pesquisa de Processos de Produtos do Departamento de Desenvolvimento da Yakult Honsha Co., Ltd. (Kunitachi, Tóquio, Japão). Ambas as bebidas foram transportadas para o Yakult Central Institute sob refrigeração. Uma vez por semana, as bebidas teste e de controle foram transportadas do Yakult Central Institute para a CPCC Co., Ltd. sob refrigeração, para administração aos participantes do estudo.
